脂肪酸的測定方法和原理

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脂肪酸的測定方法主要包括氣相色譜法（GC）、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法（GC-MS）以及滴定法等，其原理基于脂肪酸甲酯化后的分離和檢測，以下是具體介紹：

測定方法

• 氣相色譜法（GC）
  • 原理：利用試樣中各組分在色譜柱中的氣相和固定液液相間的分配系數(shù)不同，當(dāng)氣化后的試樣被載氣帶入色譜柱中運(yùn)行時(shí)，組分就在其中的兩相間進(jìn)行反復(fù)多次的分配（吸附-解吸附或溶解-放出）。由于固定相對各組分的吸附或溶解能力不同，因此各組分在色譜柱中的運(yùn)行速度就不同，經(jīng)過一定的柱長后，試樣中被分離的各組分即能達(dá)到完全分離。
  • 操作步驟：通常包括脂肪提取、甲酯化、色譜分析等步驟。脂肪提取可采用索氏提取或氯仿-甲醇法等方法；甲酯化過程通常涉及使用如氫氧化鈉甲醇溶液、硫酸甲醇溶液等試劑，將脂肪酸酯轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的脂肪酸甲酯；色譜分析則使用氣相色譜儀進(jìn)行。
    
• 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法（GC-MS）
  • 原理：結(jié)合了氣相色譜的分離能力和質(zhì)譜的定性、定量能力。樣品經(jīng)GC分離為單一組分，各組分依次與載氣同時(shí)流出色譜柱，再經(jīng)接口進(jìn)入質(zhì)譜儀。樣品分子在離子源內(nèi)電離，產(chǎn)生各種各樣的離子，這些離子經(jīng)過質(zhì)量分析器按其質(zhì)荷比分離，分離后的離子依次被檢測器檢測，并形成一個(gè)按離子質(zhì)荷比排列的質(zhì)譜圖。計(jì)算機(jī)自動檢索并迅速識別樣品，提供各組分的定性和定量信息。
  • 操作步驟：與氣相色譜法類似，但在色譜分析后增加了質(zhì)譜分析步驟。
    
• 滴定法
  • 原理：使用氫氧化鉀-乙醇溶液滴定中和提取液中的游離脂肪酸，以酚酞變色顯示終點(diǎn)。該方法簡單易行，不需要特殊儀器和試劑。
  • 操作步驟：包括試樣處理、測定和空白試驗(yàn)等步驟。試樣處理通常是用無水乙醇提取脂肪酸；測定則是用氫氧化鉀-乙醇溶液滴定提取液中的游離脂肪酸；空白試驗(yàn)則是用無水乙醇代替試樣進(jìn)行滴定，以消除系統(tǒng)誤差。